蛋白质谱检测

蛋白质谱技术简单来说就是一种将质谱仪用于研究蛋白质的技术。它的基本原理是蛋白质经过蛋白酶的酶切消化后成肽段混合物，在质谱仪中肽段混合物电离形成带电离子，质谱分析器的电场、磁场将具有特定质量与电荷比值（即质荷比，M/Z）的肽段离子分离开来，经过收集分离的离子，确定每个离子的M/Z值。经过质量分析器可分析出每个肽段的M/Z，得到蛋白质所有肽段的M/Z图谱，即蛋白质的一级质谱峰图。离子选择装置自动选取强度较大肽段离子进行二级质谱分析，输出选取肽段的二级质谱峰图，通过和理论上蛋白质经过胰蛋白酶消化后产生的一级质谱峰图和二级质谱峰图进行比对而鉴定蛋白质。一开始，蛋白质谱通过离子化（ElectrosprayIonization，ESI）或者基质辅助激光解吸电离（Matrix-assistedLaserDesorption/Ionization，MALDI）的方法对完整的蛋白质进行离子化后进入质谱分析仪器，这也被称为“top-down”蛋白分析方法。后来，完整的蛋白质通过酶切作用后，分解成多肽混合物，这些混合物进入质谱仪后，通过多肽指纹图谱或串联质谱的方法进行鉴定，这被称为"bottom-up"方法。显然，后者可以从多肽水平实现对蛋白质的分析和鉴定。右侧即是一张蛋白质谱的结果图。上半张显示的是各多肽片段的保留时间，下半张显示的是各质荷比片段的相对丰度。